两性离子缓冲液,即Good’s缓冲液,是一系列N-取代氨基磺酸,具有很好的pH稳定性,对多种化学试剂和酶是惰性。其中,吗啉系列缓冲剂包括MES,MOPS和MOPSO,均属于Good’s缓冲液,它们不与大多数金属离子形成络合物,因此适用于含有金属离子的溶液。但它们分别具体用在哪些实验中呢?本文将为大家进行总结。
MES
化学名2-(N-吗啉基)乙磺酸,分子式C6H13NO4S,25°C下pKa为6.1,pH缓冲范围5.5~6.7。其具体可用实验如下:
(1)生物缓冲液,可用来替代高毒性的二甲胂酸盐,以及离子缓冲液柠檬酸盐和苹果酸盐;
(2)通常用于细菌、酵母和哺乳动物细胞的缓冲培养基。高浓度的MES对于大多数植物是有毒的,但是在浓度为?10mM时可用于植物培养基中;
(3)作为在培养基中研究Tau蛋白的缓冲液;
(4)由于在高浓度下离子迁移率和电导率低,可用于许多类型的电泳和色谱,包括毛细管电色谱、凝胶过滤色谱、磷酸纤维素柱色谱、疏水作用色谱、阳离子交换色谱法和SDS-PAGE;
(5)可以与有机锡(IV)分子复合作为抗肿瘤剂。
(2)通常用于细菌、酵母和哺乳动物细胞的缓冲培养基。高浓度的MES对于大多数植物是有毒的,但是在浓度为?10mM时可用于植物培养基中;
(3)作为在培养基中研究Tau蛋白的缓冲液;
(4)由于在高浓度下离子迁移率和电导率低,可用于许多类型的电泳和色谱,包括毛细管电色谱、凝胶过滤色谱、磷酸纤维素柱色谱、疏水作用色谱、阳离子交换色谱法和SDS-PAGE;
(5)可以与有机锡(IV)分子复合作为抗肿瘤剂。
MOPS
化学名称3-(N-吗啡啉)丙磺酸,分子式C7H15NO4S,25°C下pKa为7.14,pH缓冲范围为6.5~7.9。具体可用实验如下:
(1)作为电泳中的运行缓冲液和用于色谱中的蛋白质纯化;
(2)配制成多种琼脂培养基,用于细菌,酵母和哺乳动物细胞的培养。但是,高于20mM的浓度不推荐用于哺乳动物细胞;
(3)可用作大肠杆菌细胞的裂解缓冲液;
(4)作为凝胶过滤色谱中的洗脱液;
(5)应用于Northern杂交,作为RNA的分离和转膜时的缓冲液;
(6)适用于二喹啉甲酸(BCA)测定;
(7)用于叶绿体薄层备样的电子传递和磷酸化研究。
(2)配制成多种琼脂培养基,用于细菌,酵母和哺乳动物细胞的培养。但是,高于20mM的浓度不推荐用于哺乳动物细胞;
(3)可用作大肠杆菌细胞的裂解缓冲液;
(4)作为凝胶过滤色谱中的洗脱液;
(5)应用于Northern杂交,作为RNA的分离和转膜时的缓冲液;
(6)适用于二喹啉甲酸(BCA)测定;
(7)用于叶绿体薄层备样的电子传递和磷酸化研究。
MOPSO
化学名称3-(N-吗啉基)-2-羟基丙磺酸,分子式C7H15NO5S,25°C下的pKa为6.87,pH缓冲范围6.2~7.6。具体可用实验如下:
(1)用作毛细管电泳中的载体电解质,以及谷胱甘肽合成酶的结晶缓冲剂;
(2)在荧光光谱法,分光光度法和等温滴定量热法中使用;
(3)与牛血清白蛋白(BSA)的肽骨架相互作用,防止BSA热变性;
(4)作为铜相关分析的缓冲组分之一;
(5)用作缓冲炭酵母提取物培养基的组成成分;
(6)制备MOPSO-乙醇缓冲体系以固定尿液来源的细胞;
(7)用作测定生物治理海洋原油副产物的缓冲体系。
(2)在荧光光谱法,分光光度法和等温滴定量热法中使用;
(3)与牛血清白蛋白(BSA)的肽骨架相互作用,防止BSA热变性;
(4)作为铜相关分析的缓冲组分之一;
(5)用作缓冲炭酵母提取物培养基的组成成分;
(6)制备MOPSO-乙醇缓冲体系以固定尿液来源的细胞;
(7)用作测定生物治理海洋原油副产物的缓冲体系。
虽然Good’s缓冲液均具有不参加和不干扰生物化学反应过程,对酶化学反应等无抑制作用,不与金属离子反应等优点。但在具体使用中,几种吗啉系列缓冲剂MES,MOPS和MOPSO的应用范围仍有一定的区别,因此,在进行实验之前,要考虑其缓冲要求及具体的实验类型,以选用最合适的缓冲剂。